黑色素瘤模型由人类恶性黑色素瘤细胞组成(A375), 正常的, 人源性表皮角化细胞(NHEK)正常, 人来源的真皮成纤维细胞(NHDF)已被培养形成多层, 高分化表皮与黑色素瘤细胞在不同阶段的CM恶性肿瘤. 在文化的不同阶段, 组织表现为径向生长期(RGP)。, 垂直生长期(VGP), 或者转移性黑色素瘤表型. 细胞在使用无血清培养基的细胞培养皿中培养, 并在体外皮肤技术的前沿达到分化水平. 在结构上, 黑色素瘤模型与体内黑色素瘤的发展密切相关, 从而为研究提供了一个有价值的工具, 理解, 并开发预防和治疗最严重的皮肤恶性肿瘤之一.
黑素瘤模型表现出类似活体的形态和生长特征，具有一致性和高度可重复性. 全层皮肤模型的表皮由有组织的基底层组成, 尖尖的, 细粒度的, 角化表皮层与体内发现的相似. 真皮腔室由含有活的正常人类真皮成纤维细胞(NHDF)的胶原基质组成。.
使用黑色素瘤组织的协议是明确和直接的. 365体育网投的黑色素瘤组织已经被许多靶向和抗黑色素瘤药物使用.
图1. 人体转移性黑色素瘤细胞(A375)全层黑色素瘤皮肤模型. A375细胞在真皮/表皮交界处形成RGP黑色素瘤结节(第11天). 培养时间延长, 黑色素瘤结节采用VGP形态(第18天)，随后分离出的细胞群侵袭真皮(转移性侵袭)(第29天). 长箭头表示表皮-真皮交界处的黑色素瘤细胞群. 短箭头显示分离的黑色素瘤细胞簇浸润真皮.
图2. 黑色素瘤FT皮肤模型的超微结构分析.
全层皮肤黑色素瘤模型(MLNM-FT-A375)透射电镜(TEM). A. 黑素瘤细胞(M)与角质形成细胞(KC)相互作用区域. B. 黑色素瘤细胞与皮下真皮基质相互作用区域(D). N，核，N，核仁. 箭头表示凋亡的黑色素瘤细胞
图3. 含有转移性SK-Mel-28细胞的全层皮肤黑色素瘤模型(MLNM-FT). s - 100抗体染色. 最初，黑色素瘤细胞在真皮/表皮交界处形成小巢(第11天). 随后出现VGP肿瘤(第25天)，随后观察到转移至真皮(第29天). 长箭头表示表皮-真皮交界处的黑色素瘤细胞群. 短箭头显示单个黑色素瘤细胞浸润真皮.
图4. N-Cadherin黏附分子在MLNM-FT-A375全层黑色素瘤皮肤模型中的表达. N-Cadherin抗体染色，40X. 注意N-Cadherin表达水平随培养时间的增加而增加.
肿瘤侵袭和抗黑色素瘤药物筛选
365体育网投的黑色素瘤组织呈放射状生长, 垂直增长阶段, 转移性黑色素瘤的表型, 平行于体内黑色素瘤的发展. 这个模型为肿瘤学家和癌症研究人员提供了一个有价值的研究工具, 理解, 并开发预防和治疗最严重的皮肤恶性肿瘤之一. 浏览我们的黑色素瘤参考 365体育网投参考图书馆 看看医生和研究人员是如何使用我们的黑色素瘤组织的.
组织:
工具: 全厚度黑色素瘤皮肤构建(MLNM-FT-A375试剂盒)由24个组织组成. (组织“包”包含组织, 少量培养基, and plasticware; contact 365体育网投 for specific kit contents.)
基质: 使用单孔组织培养板插入物(e.g. Millicell CM单孔组织培养板插入，孔径= 0.4µm，比表面积= 0.6 cm2).
文化: 最初被淹没，然后在气液界面.
组织学: 上皮:8-12层上皮细胞加角质层(基底层), 尖尖的, and 细粒度的 layers); Dermis: Collagen gel containing fibroblasts. 早期黑色素瘤细胞在真皮/表皮交界处形成结节. 晚期黑素瘤向RGP(径向生长期)进展, VGP(垂直生长阶段)和连续侵入真皮成分.
很多数字: 每周生产的组织批号都有一个特定的批号. 在批号的末尾附加一个字母，以区分给定数量组织中的单个试剂盒. 所有的组织包在细胞方面都是相同的, medium, 处理, 培养条件, 等.
装运: 组织在4°C的培养基中运输，在6孔板中添加琼脂糖凝胶.
装运: 周一. 如有特殊要求，也可于周四装运.
交付: 周二上午，通过联邦快递优先服务(美国). 美国以外:周二-周四，视地点而定.
保质期: 包括运输时间，组织在使用前可在4°C保存3天. 但是，除非必要，不建议延长储存时间. 除了, 如果组织在同一天一致使用，可获得最佳的重现性, e.g. 周二下午或4°C过夜后(周三上午).
长度的实验: 黑色素瘤的发展和进展可持续培养长达4周，并能很好地保留正常表皮形态. Cultures must be fed every other day using 365体育网投 culture stands (MEL-STND; click on this link for photo) along with 5.0毫升MLNM-FT-MM.
替代组织:
MLNM-FT-A375(6天): 早期MLNM-FT-A375组织. 没有在气液界面培养组织. 客户收到所需的培养基(MLNM-FT-GM)继续培养并生产MLNM-FT-A375. 由于本产品的专利性质，在订购前需要与365体育网投技术代表进行讨论. 设计用于研究早期黑色素瘤发展的实验设计要求使用早期组织.
MLNM-FT-EXP: 与MLMN-FT-A375相同，只是365体育网投将A375细胞替换为客户提供的黑色素瘤细胞.
细胞:
类型: Human melanoma cells (A375); Normal human epidermal keratinocytes (NHEK); Normal human dermal fibroblasts (NHDF).
来自: 马里gnant melanoma cell line (A375); Neonatal-foreskin tissue (NHEK); Neonatal skin (NHDF);
选择: 人类恶性黑色素瘤细胞SK-Mel-28.
筛选: 艾滋病毒，乙型肝炎，丙型肝炎，支原体.
介质:
基础培养基: MCDB 153基本培养基.
生长因子/激素:表皮生长因子, 胰岛素, 氢化可的松和其他专有的表皮分化刺激剂.
血清: 没有一个.
抗生素: 庆大霉素5µg/ml(庆大霉素正常水平的10%).
抗真菌剂: 两性霉素B 0.25µg / ml.
酸碱指示剂: 酚红(0.0012 g/l).
其他添加剂: 用于增强表皮屏障形成的脂质前体(专有).
分析/维护medium: MLNM-FT-MM用于分析以及MLNM-FT-A375组织的长期维护.
质量控制和无菌:
目视检查: 所有组织都要进行肉眼检查，如果发现有物理缺陷, 组织被拒绝装运.
最终用途检测:保留生产批的组织, 又长了7天, 固定的组织学, 和分析.
不育: 在整个生产过程中使用的所有介质都要进行无菌检查. 维持培养基加或不加抗生素孵育1周，并检查无菌. 用于运输的24孔板上的琼脂糖凝胶也要培养一周，并检查任何污染的迹象.
筛查病原体: 所有的细胞都经过PCR检测，HIV、乙肝和丙肝均呈阴性. 然而，没有一种已知的测试方法可以完全保证细胞是无病原体的. 因此, 这些产品和所有人类衍生产品应按照CDC-NIH手册中建议的BSL-2级别(生物安全级别2)或更高级别处理, “微生物和生物医学实验室的生物安全,” 1998. 如需进一步帮助，请联系您的现场安全主任或365体育网投技术服务.
地段失败的通知: 如果一个组织批次没有通过我们的质量控制或无菌测试, 我们会通知客户，并在适当的时候免费更换纸巾. 因为我们的QC和无菌测试是在出货后进行的, 通知将尽快(在正常情况下，无菌故障将在发货后8天内通知).
